PpLocalità: Pieve Emanuele, IT, 20090 /ppbJob title /b: Post doc /ppNell’ambito del Piano Nazionale di Ripresa e Resilienza (PNRR), l’IRCCS Istituto Clinico Humanitas ha avvitato le procedure di selezione pubblica per il reclutamento nell’ambito dei progetti di bValorizzazione e potenziamento della ricerca biomedica del SSN /b. /ppbRiferimento Commessa e Cup /b: bNumero progetto /b: PNRR-MCNT, bCUP /b: E27G /ppbTitolo e Breve Descrizione Del Progetto /b: bUtilizzo della tecnologia degli oligonucleotidi modulatori dello splicing per manipolare gli eventi di splicing alternativo aberrante nella terapia della sclerosi multipla /b (Exploiting the Splice-Switching Oligonucleotides technology to modulate aberrant alternative splicing events in multiple sclerosis therapy) /ppLo Splicing Alternativo (AS) è Un Meccanismo Post-trascrizionale Che Porta Alla Produzione Di MRNA Diversi a Partire Da Singoli Geni. Una Deregolazione Del Meccanismo Di Splicing Alternativo è Stata Implicata In Molte Malattie, Tra Cui La Sclerosi Multipla (SM), Una Malattia Autoimmune Cronica Del Sistema Nervoso Centrale Caratterizzata Da Linfociti T Autoreattivi. /ppIl progetto si propone di: /pulliesplorare il profilo dello splicing alternativo nei linfociti T sia di pazienti affetti da SM sia di controlli per evidenziare gli eventi di splicing alternativo deregolati; /lilimodulare significativamente gli eventi di splicing alternativo fortemente deregolati nei linfociti T utilizzando oligonucleotidi antisenso per lo switch dello splicing; /lilivalutare la potenziale patogenicità degli eventi di splicing alternativo identificati in termini di traduzione di potenziali neoepitopi. /li /ulpbProfilo Professionale e Breve Descrizione Delle Attività Richieste /b: bRuolo /b: post doc /ppIl candidato selezionato avrà un ruolo chiave nello sviluppo di questo progetto, le principali attività previste includeranno: /pulliProfilazione dello splicing alternativo:ulliIsolamento di RNA: Isolamento di RNA di alta qualità da linfociti T di pazienti con SM e controlli sani. /liliSequenziamento RNA-seq: Esecuzione di esperimenti di sequenziamento RNA-seq ad alta profondità per identificare gli eventi di splicing alternativo differenzialmente espressi nei due gruppi. /li /ul /liliValidazione degli eventi di splicing:ulliPCR quantitativa (qPCR): Validazione degli eventi di splicing identificati tramite RNA-seq utilizzando qPCR. /liliWestern blotting: Analisi dell'espressione delle isoforme proteiche derivanti dagli eventi di splicing alternativi. /li /ul /liliModulazione dello splicing alternativo:ulliDesign di oligonucleotidi antisenso: Progettazione di oligonucleotidi antisenso specifici per modulare gli eventi di splicing alternativi di interesse. /liliTrasfezione di linfociti T: isolamento di linfociti T da pazienti con SM e controlli sani. Valutazione dell’immunofenotipo di tali linfociti. Trasfezione di linfociti T con gli oligonucleotidi antisenso e valutazione dell'efficacia di modulazione dello splicing. /li /ul /liliValutazione della patogenicità:ulliSaggi immunoenzimatici (ELISA): Valutazione della reattività degli anticorpi contro i potenziali neoepitopi nei pazienti con SM. /li /ul /li /ulpbTitoli di Studio richiesti /b: Dottorato di ricerca in ambito di biologia cellulare, biologia molecolare e/o genetica /ppbCompetenze Tecniche /b: /pulliSolida esperienza in tecniche di biologia molecolare e cellulare, tra cui isolamento di RNA, qPCR, Western blotting, trasfezione cellulare, sequenziamento Sanger, microscopia. /liliOttima conoscenza delle metodiche di preparazione delle libraries per sequeziamento di RNA (RNA-seq bulk, e single cell sequencing). /liliEsperienza riconosciuta nella caratterizzazione fenotipica e funzionale delle cellule del sistema immunitario, con particolare attenzione all’analisi dei sottotipi cellulari e alle loro dinamiche nei processi fisiologici e patologici. /liliCapacità di lavorare in modo indipendente e in team. /liliOttime capacità comunicative sia scritte che orali, per presentare i risultati della ricerca. /li /ulpRequisiti preferenziali di scelta del candidato: Si richiede una solida esperienza nel ruolo di ricercatore/a in biologia molecolare e cellulare, con comprovata capacità di progettazione e conduzione di esperimenti di biologia molecolare. E’ inoltre fondamentale la conoscenza approfondita della lingua inglese. /ppbData pubblicazione avviso /b: 01/10/2025, bData Scadenza avviso /b: 24/10/2025, bData di inserimento prevista /b: 19/11/2025 /p /p #J-18808-Ljbffr